ДЕТАЛИ РЕШЕНИЯ

2026-04-14

Как гомогенизировать почечную ткань весом 0,5 г | Пошаговый протокол (руководство по ручному гомогенизатору)

Введение

Почечная ткань плотная и богата ферментами, поэтому ее гомогенизация представляет сложность — особенно для небольших образцов весом 0,5 г. Неправильная обработка может привести к неполному разрушению ткани или деградации белков/РНК.

В этом руководстве мы представим пошаговый протокол гомогенизации почечной ткани с использованием ручного гомогенизатора, а также практические советы для получения воспроизводимых результатов при экстракции белков и РНК.

Необходимое оборудование и реактивы

Для стабильных результатов подготовьте:

Ручной тканевой гомогенизатор (высокоскоростной, 8000–30000 об/мин)
Стерильные центрифужные пробирки (1,5–5 мл)
Предварительно охлажденный лизирующий буфер
- RIPA (для экстракции белков)
- TRIzol (для экстракции РНК)
Ингибиторы протеаз или РНКаз
Ледяная баня (критически важна для контроля температуры)

👉 Поддержание низкой температуры всех компонентов необходимо для предотвращения деградации образцов.

Пошаговый протокол гомогенизации ткани

Шаг 1: Подготовка образца

Все время держите ткань на льду
Нарежьте 0,5 г почечной ткани на фрагменты <1 мм
Добавьте 1,5–2 мл охлажденного лизирующего буфера (соотношение 1:3–1:4)

Шаг 2: Настройка прибора

Установите предварительно охлажденный зонд
Установите скорость 28000–30000 об/мин
Проверьте плавность работы перед использованием

Шаг 3: Процесс гомогенизацииИспользуйте короткие импульсы:

Работа 5–8 секунд
Пауза 30 секунд (на льду)
Повторить 2–3 цикла

👉 Погружайте зонд на ~2/3 в жидкость👉 Не допускайте контакта со стенками пробирки

Шаг 4: Контроль температуры

Поддерживайте температуру образца ≤4 °C
При необходимости охлаждайте зонд между циклами

👉 Перегрев — основная причина деградации РНК и белков

Шаг 5: Завершение процессаГомогенизация завершена, когда:

Раствор становится однородным
Отсутствуют видимые фрагменты ткани

⚠️ Не перегомогенизируйте образец

Частые ошибки

Непрерывная работа без пауз → перегрев
Неправильный объем зонда → плохие результаты
Отсутствие ледяной бани → деградация образца
Отсутствие предварительного нарезания → низкая эффективность
Работа зонда на сухую → повреждение оборудования

Советы по экстракции белков и РНК

Для экстракции белков

Используйте буфер RIPA + ингибиторы протеаз
Рекомендуется 2 цикла по 5 секунд
Избегайте образования пены

Для экстракции РНК

Используйте TRIzol и расходные материалы без РНКаз
Работайте быстро, чтобы минимизировать деградацию
Строго соблюдайте холодовые условия

Почему стоит выбрать гомогенизатор BS-D160

BS-D160 разработан для гомогенизации малых тканевых образцов и предлагает:

Высокую скорость (до 30000 об/мин) → эффективное разрушение
Широкий диапазон объемов (0,1–50 мл)
Автоклавируемые зонды из нержавеющей стали (316L + PTFE)
Компактную ручную конструкцию для гибкой работы

👉 Идеально для лабораторий, работающих с ограниченными или ценными образцами.

Часто задаваемые вопросы

Какая скорость оптимальна для гомогенизации ткани?Для плотных тканей, таких как почка, рекомендуется 28000–30000 об/мин.
Сколько времени занимает гомогенизация?Обычно достаточно 10–20 секунд общего времени (в импульсах).
Как предотвратить деградацию РНК?Держите все на льду, используйте материалы без РНКаз, работайте быстро.